ПЦР 12

Содержание

Анализ ПЦР на 12 инфекций

ПЦР 12

Анализ ПЦР на 12 инфекций – это быстрое и высокоточное исследование, которое позволяет выявить причины острых, хронических и даже скрытых заболеваний.

Определить возбудителя болезни по одним только симптомам представляется возможным не в каждом случае: человеческий организм располагает ограниченным набором реакций на заболевание.

Например, повышенная температура является стандартным ответом иммунитета практически на любое вторжение микроорганизмов.

А постановка диагноза методом перебора отнимает драгоценное время и может нанести вред пациенту.

Показания

Сдать анализы ПЦР на 12 инфекций может каждый человек, у которого есть жалобы на самочувствие. Если симптомы наводят на мысль об инфицировании, то ПЦР – это лучший на сегодняшний день метод диагностики.

С помощью ПЦР выявляются вирусные болезни:

  • разновидности вируса герпеса;
  • туберкулез;
  • ВИЧ-инфицирование;
  • бактерия хеликобактер пилори;
  • уреаплазмоз;
  • энцефалит клещевой;
  • гепатиты разных видов;
  • цитомегаловирус.

ПЦР активно применяется урологами: с помощью этого анализа быстро и достоверно выявляется заражение мочевыводящих путей, мочевого пузыря, почек.

Гинекологи тоже не пренебрегают анализом ПЦР, ведь известно, что женщины страдают мочеполовыми болезнями куда чаще мужчин: это обусловлено особенностями женской мочеполовой системы.

Многие возбудители инфекций мочевыводящих путей локализуются внутриклеточно, что затрудняет постановку диагноза, а для анализа ПЦР это не проблема.

Преимущества методики

В основе анализа ПЦР на 12 инфекций лежит методика полимеразной цепной реакции (ПЦР). Благодаря этому методу становится возможным провести количественное увеличение определенных молекул ДНК в анализируемом образце. Этот способ похож на клонирование, за что американский биохимик Кэри Муллис и удостоился Нобелевской премии в 1993 году.

Как и человек, вирусы и бактерии имеют свою неповторимую ДНК. Именно эти молекулы и выявляет анализ ПЦР, позволяя обнаружить даже крайне малую концентрацию вредоносных микробов. Привычные анализы с применением центрифуги, реактивов и электрофореза не могут похвастаться подобной чувствительностью.

Известно несколько вариантов выполнения анализа ПЦР на 12 инфекций, но в клиниках чаще используется метод «ПЦР в реальном времени». Этот вариант предпочитают за удобство и скорость: наблюдая за биологическим образцом в режиме реального времени, можно обнаружить болезнетворные бактерии в течение 20-60 минут.

Другие преимущества ПЦР в реальном времени:

  • минимальный риск получения ложноположительного результата;
  • возможность выявления нескольких инфекционных культур одновременно (анализы, основанные на химических реактивах, нацелены только на один вид или род микробов);
  • процесс и результат исследования фиксируются в электронном виде.

По этим причинам многие практикующие врачи Москвы считают любую другую диагностику неполной и достоверной без анализа ПЦР.

Подготовка к обследованию

Образцами для анализа ПЦР служат разные биологические жидкости: слюна, моча, кровь, секрет уретры, в сложных случаях – даже плевральная и спинномозговая жидкость. Но чаще всего приходится сдавать мазок.

Как готовиться к сдаче анализа ПЦР – это зависит от биологического образца, который предстоит отправить на исследование.

Если на исследование идет слюна или мазок зева, пациенту необходимо воздержаться от приема пищи, алкоголя и лекарств в течение четырех часов перед сдачей анализа.

Если требуется сдать кровь, то делается это, как и при обыкновенном общем анализе, натощак, а за сутки до обследования желательно воздержаться от жирной пищи и алкоголя.

Перед сдачей мочи женщинам и мужчинам следует подготавливаться, несколько ужесточая нормы личной гигиены: женщинам желательно после подмывания поставить тампон, а мужчинам – тщательно промыть все кожные складки.

При исследовании спермы или мазков влагалища рекомендовано воздерживаться от половых контактов в течение двух-трех суток.

Процесс проведения

Анализ ПЦР на 12 инфекций делается практически также, как и обычные анализы. Пациенту не придется как-то по-особенному готовиться и приспосабливаться: весь процесс забора биоматериала такой же, как и при обычных обследованиях.

Мазки на мочеполовые инфекции часто берутся непосредственно в кабинете врача:

  • у уролога: это мазки из уретры;
  • у гинеколога: забор материала из влагалища, шейки матки, цервикального канала.

Если требуется сдать кровь, смывы из носоглотки или миндалин, то придется обратиться в процедурный кабинет или лабораторию.

Таким образом, для пациента нет разницы в плане комфорта – сдавать пять или шесть традиционных анализов или комплексный ДНК-тест.

Расшифровка результатов

Грамотно расшифровать анализ ПЦР способен только специалист.

Дело в том, что человеческий организм служит прибежищем для неисчислимого множества вирусов, бактерий и грибков, включая даже такие опасные, как туберкулез или кишечная палочка.

При нормальном уровне здоровья наш организм контролирует все эти инфекции с помощью иммунных клеток. То есть, микробы внутри организма есть, но бактерий слишком мало, чтобы вызвать заболевание.

Доктор расшифровывает анализ ПЦР, ориентируясь именно на количество единиц вируса, либо бактерий в биологической жидкости. Когда концентрация микроорганизмов достигает предельно допустимые нормы – это свидетельствует о наличии заболевания, даже если болезнь протекает бессимптомно, незаметно для пациента, тем не менее нанося вред здоровью.

Цены на полный анализ ПЦР-12 в Москве примерно одинаковы во всех клиниках: около 4000 рублей.

Однако сдавать полный комплект исследований нужно не всегда. Так, при заболеваниях, передающихся половым путем, не нужны мазки из зева, а при диагностике туберкулеза, само собой, можно обойтись без забора из цервикального канала.

Например, выявление цитомегаловируса требует забора следующих образцов:

  • биоптат;
  • мокрота;
  • слюна;
  • сперма;
  • моча;
  • соскоб;
  • секрет предстательной железы.

Стоить такое исследование будет приблизительно 1000 рублей.

Пцр на 12 инфекций

ПЦР 12

Ситуация, когда у одного пациента венерологического профиля обнаруживается сразу несколько возбудителей, стала очень распространенной.

Для облегчения диагностики такого «букета», современные лаборатории предлагают комплексный анализ методом ПЦР на 12 показателей. Это 11 наиболее часто встречающихся венерических инфекций и двенадцатый – тест качества взятия материала (КВМ).

Расшифровывается ПЦР как полимеразно-цепная реакция. Это один из самых первых методов молекулярно-генетической диагностики, основанный на поиске в исследуемом материале уникальных последовательностей ДНК или РНК. Обнаруживать можно генетический материал любого происхождения: вирусного, бактериального, грибкового и даже участки генома клеток самого человека.

Как правило, используется готовый промышленный картридж. В нем заранее «заряжены» все реактивы для проведения ПЦРанализа сразу на 12 показателей.

Пцр на 12 инфекций: что выявляется?

В разных лабораториях перечень исследуемых инфекций может незначительно меняться.

Наиболее часто в комплекс включается выявление:

  • Хламидий (Chlamydia trachomatis).
  • Человеческой микоплазмы (Mycoplasma hominis).
  • Гарднерелл (Gardnerella vaginalis).
  • Гонококков (Neisseria gonorrhoeae).
  • Трихомонад (Trichomonas vaginalis).
  • Генитальной микоплазмы (Mycoplasma genitalium).
  • Вирусов герпетической группы (Human herpesvirus 1, 2, Herpes simplex virus 1, 2 или HSV-1, HSV-2).
  • Цитомегаловирусов (Cytomegalovirus).
  • Вирусов папилломы человека – ВПЧ (Human papillomavirus), в частности тех типов, которые обладают наибольшим риском онкогенности.
  • Уреаплазм (Ureaplasma urealyticum+parvum).
  • Дрожжевых грибков рода кандид (Candida albicans).
  • Контроль взятия мазка (КВМ).

При подсчете наименований нужно учитывать, что в группе герпесвирусов исследуется два показателя: HSV-1 и HSV-2. Подобный список ПЦР исследований из 12 позиций предлагает популярная лабораторная служба Инвитро. Диагностическим материалом служит мазок из мочеиспускательного канала.

Последний пункт в перечне (КВМ) означает, что для подтверждения качества исследуемого образца также будет проведен поиск уникальной геномной последовательности эпителиальных клеток, которые выстилают уретру. Здесь целью служит ген HMBS человека, который отвечает за продуцирование специфического фермента – гидроксиметилбилан синтетазы.

Если результат будет положительным и в образце будет более 250 копий HMBS, значит забор материала проведен корректно.

В случае отрицательного теста КВМ, доверять негативным результатам комплекса ПЦР в отношении всех 12 инфекций, какие входят в анализ – не следует, лучше повторить.

В то же время положительные ответы в отношении патогенных возбудителей следует рассматривать как диагностически верные.

При проведении молекулярно-генетического исследования методом ПЦР, проводится ряд этапов с привлечением высокотехнологичного оборудования.

Упрощенно, алгоритм таков:

  • Растворение (лизис) всех клеточных органелл до инертных соединений, благодаря чему высвобождаются нити ДНК.
  • Выделение уникального фрагмента ДНК с помощью специфического фермента, который реагирует только на заданную заранее геномную последовательность, например – только на геном гонококка.
  • При активации фермента, в образце начинают клонироваться участки ДНК одного или нескольких патогенных микробов из тех 12 возбудителей ИППП, которые являются целью ПЦР. Этот этап называется амплификацией.
  • Последний этап – визуализация. К исследуемому образцу добавляются специальные вещества, которые связываются с фрагментами ДНК, а также светятся в ультрафиолетовом свете (флюоресцируют).

Аппарат определяет оттенки цвета и подсчитывает количество светящихся молекул.

После этого выдает протокол обследования с указанием наличия патогенных микробов в соскобе (качественный результат). Если проводилось ПЦР в режиме реального времени, то предоставляется и количественная оценка. Тогда прибор показывает объем микробной массы в отношении каждого интересующего патогенного микроорганизма.

Особенности исследования ПЦР 12

Для качественного и достоверного анализа нужно высокотехнологичное оборудование и дорогие расходные материалы. Поэтому цена исследования 12 инфекций методом ПЦР достаточно ощутима. Но все равно остается меньше, чем при работе по каждому показателю в отдельности.

Также большой популярности ПЦР способствуют заметные преимущества методики:

  • Минимальное участие человека, которое ограничивается забором материала и постановкой образца в работу. Это снижает вероятность человеческой ошибки.
  • Высочайшая чувствительность и специфичность. Реакция амплификации запускается при минимальных количествах микроба в образце. Если ДНК не найдено, то ферменты остаются не активными, клонирования генома не происходит.
  • Быстрое проведение. От момента постановки контейнера в работу до получения результатов, проходит несколько часов.

К сожалению, скорость диагностического исследования иногда теряется из-за технологических особенностей методики.

Сдатьанализ для проведения ПЦР по 12 позициям можно в любой момент, но в работу он пойдет только тогда, когда будет собрано несколько образцов. Сколько – зависит от используемого картриджа, который нужно заполнить полностью.

Подготовка к ПЦР 12

Общие требования к сдаче диагностического материала таковы:

  • Профилактически, женщины обследуются не ранее пятого дня после месячных.
  • От момента полового контакта, трансвагинального УЗИ или кольпоскопии должно пройти не менее суток.
  • Желательно не принимать антибиотики минимум 14 дней до проведения исследования.
  • Если есть активное воспаление урогенитальной сферы, то забор проводится в день обращения.
  • Также от момента мочеиспускания до взятия уретрального мазка, должно пройти не менее 2 часов.

Чтоб сдать диагностический материал для проведения ПЦР на 12 возбудителей, стоит обратиться к квалифицированному дерматовенерологу, в Москве опытные специалисты есть.

Профессиональный доктор соберет образец по всем правилам и подскажет, какую лабораторию выбрать, чтоб получить наиболее точный и быстрый результат.

Если вам необходимо безболезненно сдать Пцр на 12 инфекций, обращайтесь к грамотному венерологу.

Больно ли сдавать анализ ПЦР 12?

Часто люди сомневаются, нужно ли сдавать ПЦР на 12 ИППП.

Основные аргументы, которые они приводят:

  1. У меня нет симптомов венерических заболеваний.

Аргумент ошибочный.

Симптомов нет не менее чем у 50% пациентов.

Они появятся позже.

Возможно, на стадии осложнений.

Некоторые осложнения необратимы.

Лечить запущенные половые инфекции гораздо труднее, дольше и дороже, чем свежие.

Аргумент из детского сада.

Часто детей нельзя затащить в кабинет, чтобы сделать прививку, потому что это больно.

Но ум взрослых людей в большинстве случаев отличается от разума пятилетних детей.

Они понимают, что неприятные ощущения продолжительностью в несколько секунд – ничто, по сравнению с теми рисками, что несут в себе инфекционные заболевания.

К тому же, в нашей клинике используется авторская безболезненная методика забора мазков для ПЦР.

Поверьте, лечиться от запущенных форм половых инфекций в разы, а то и в десятки раз дороже.

Некоторые заболевания дают тяжелые осложнения, их приходится месяцами лечить в стационаре.

Другие приводят к бесплодию.

На лечение или преодоление этого состояния люди тратят десятки тысяч долларов (реконструктивные операции на маточных трубах, многочисленные попытки ЭКО).

  1. Нужно куда-то идти, тратить время…

Вы потратите не более 1 часа вашего времени.

Нужно просто прийти и сдать мазок.

Возвращаться за результатами не обязательно – вы получите их на электронную почту.

Вернуться придется, только если будет обнаружена какая-то инфекция.

  1. Сдавать анализы на половые инфекции стыдно.

У нас их можно сдать анонимно.

В случае обнаружения ЗППП можно анонимно вылечиться.

Такая возможность предусмотрена российским законодательством.

Государство понимает, что без возможности анонимного лечения люди будут меньше обращаться, что плохо с точки зрения эпидемиологии.

Невыявленный носитель инфекции разносит ИППП, увеличивая заболеваемость в популяции.

Какие инфекции входят в ПЦР 12?

В перечень 12 штук могут входить разные инфекции.

Всё зависит от лаборатории.

Не обязательно их должно быть именно 12.

Но в качестве примера давайте рассмотрим лабораторию Инвитро, ПЦР на 12 ЗППП здесь включает определение ДНК таких возбудителей:

  • герпес 1 и 2 типа
  • цитомегаловирус
  • ВПЧ 2 типов (16 и 18) – самых опасных, являющихся основными причинами цервикального рака
  • гонококк
  • гарднерелла
  • микоплазма хоминис
  • микоплазма гениталиум
  • уреаплазма парвум
  • уреаплазма уреалитикум
  • хламидия
  • кандида
  • трихомонада

Метод хорош тем, что выявляет любые патологии, в том числе вирусные.

ПЦР – очень точный способ диагностики.

Перечисленные патогены будут выявлены даже при их минимальном количестве.

Поэтому ПЦР информативна на ранних стадиях или при субклиническом течении инфекционных заболеваний.

Пцр 12 с концентрацией – зачем и когда?

Есть два вида тестов ПЦР:

  • качественные – отвечают на вопрос, есть инфекция или её нет
  • количественные – определяют концентрацию бактерий (копий ДНК в мл.)

Читать также  Анализ секрета простаты

В некоторых случаях достаточно качественного определения.

В частности, для тех бактерий, которые являются однозначно патогенными.

Даже минимальные концентрации таких микроорганизмов опасны.

При их обнаружении в любом случае назначают лечение.

Причем дозы препаратов и их выбор не зависит от количественных показателей.

Схема лечения определяется лишь давностью инфицирования и топикой поражения структур репродуктивной системы.

К таким болезням относятся:

  • сифилис
  • хламидиоз
  • микоплазма гениталиум
  • трихомониаз
  • гонорея

Кроме того, обнаружение вирусов семейства герпеса говорит о том, что инфекция в данный момент активная.

Потому что во время ремиссии количество вирусов уменьшается до неопределяемого уровня.

Зачем нужны количественные результаты при определении других возбудителей?

Причин несколько:

  • возбудители могут проявлять патогенность, только при достижении определенного количества (кандида, вирус папилломы)
  • при малом количестве бактерий человека не лечат
  • врачу нужно оценить тенденции, чтобы понять, работает ли лечение, либо болезнь прогрессирует
  • количественные показатели позволяют оценить роль того или иного микроорганизма в протекающем воспалительном процессе урогенитального тракта (микоплазма хоминис, уреаплазма)

Количественные показатели часто влияют на решение врача.

Например, у женщины в ходе обследования на 12 инфекций может обнаружиться ВПЧ.

Если вирус содержится в малой концентрации, то он не опасен.

Но если концентрация клинически значимая, с высокой вероятностью инфекция:

  • станет персистирующей
  • вызовет диспластические изменения шейки матки
  • повысит вероятность развития рака

При малом количестве вируса за женщиной достаточно установить наблюдение.

Её просят вернуться через полгода и сдать анализы повторно.

С высокой вероятностью к этому времени вируса в её организме уже не будет.

Но если концентрация высокая, необходимо противовирусное лечение.

Женщине назначают иммуномодуляторы, противовирусные препараты.

Она повторно сдает анализы, чтобы оценить, уменьшается ли концентрация вируса.

Часто такое лечение приводит к элиминации возбудителя.

При этом уже начавшиеся неопластические процессы в матке могут регрессировать даже без инвазивного лечения («прижигания» патологически измененных участков эпителия).

Другая ситуация: в урогенитальном тракте начался воспалительный процесс.

Помимо прочих бактерий, выделена уреаплазма.

В малых количествах она считается не опасной.

Как узнать, принимает ли она участие в воспалительном процессе, или болезнь спровоцирована другими бактериями?

Для этого делают количественное исследование.

Если концентрация уреаплазм больше 10 в 4 степени копий ДНК в мл, скорее всего, она принимает активное участие в патологическом процессе урогенитального тракта.

Количественные показатели имеют значение для допуска женщины к инвазивным процедурам.

Операции на органах малого таза, ЭКО (требующее на определенном этапе проведения пункции фолликулов) или гистеросальпингография не могут быть проведены при большом количестве микоплазм, уреаплазм, кандид.

Потому что в этом случае присутствует высокий риск инфекционных осложнений.

Зачем нужен ПЦР 12 при установленном диагнозе?

Часто врачи назначают Пцр на 12 инфекций пациентам, у которых уже диагностированы венерические заболевания.

Например, у человека появляются обильные выделения из урогенитального тракта.

Он идёт к врачу.

Тот берет мазок и смотрит под микроскопом.

Сразу же выясняется, что у больного гонорея.

Казалось бы: диагноз очевиден, можно приступать к лечению, а затем оценивать его результаты и отпускать человека домой.

Но вместо этого врач назначает анализ Пцр на 12 инфекций.

Зачем, если диагноз уже установлен?

Потому что наличие одной инфекции не исключает другой.

Более того, вероятность обнаружить других возбудителей в клинически значимых концентрациях у пациента с уже выявленным венерическим заболеванием очень высокая.

Она выше 50-60%.

То есть, риск обнаружения патогенов гораздо больше, чем у человека, который приходит обследоваться с профилактической целью без каких-либо симптомов.

С чем это связано?

Причин несколько:

  1. С высокой вероятностью человек, у которого обнаружена половая инфекция, ведет активную и разнообразную сексуальную жизнь.

Поэтому не исключено, что он нахватался и других ЗППП.

Возможно, некоторые из них протекают в скрытой форме.

Но сейчас отличное время, чтобы выявить их и пролечиться.

  1. Носитель инфекции мог иметь целый «букет» венерических заболеваний.

Допустим, человек нечасто меняет партнеров.

Читать также  Анализ на ИППП: что входит и как подготовиться к сдаче

Возможно, у него всего один постоянный партнер.

Тем не менее, гонорея не появилась из ниоткуда.

Она пришла из определенного источника: от больного человека.

Вполне вероятно, что у этого же человека есть и другие инфекции.

Их передача тоже могла произойти при половом акте.

Особенно высок риск, если больной несколько раз вступал с ним в интимную связь.

  1. Часто происходит активизация «дремлющей» инфекции после заражения новым ЗППП.

Вполне вероятно, что в организме долго живёт и никого не трогает микоплазма хоминис.

Бактерий мало, они чрезмерно не размножаются, так как сдерживаются иммунитетом.

Но тут присоединяется гонококк.

В результате нарушается работа иммунной системы, создаются благоприятные условия для роста других микроорганизмов.

«Дремлющие» инфекции просыпаются и усугубляют воспалительные реакции в урогенитальном тракте.

Если врач не назначает ПЦР на 12 или другое количество инфекций после выявления одного из возбудителей венерических заболеваний, это чревато неудачами в лечении.

Симптомы могут не исчезать после курса антибактериальной терапии.

Гонококк исчезает, но другие бактерии сохраняются.

К тому же, часть гонококков могут «прятаться» внутри трихомонад, если это заболевание сопутствует гонорее.

Тогда патология рецидивирует после лечения или переходит в скрытую форму.

Таким образом, каждому пациенту, который обратился к венерологу, стоит сдать анализы на несколько основных ЗППП.

В том числе в случаях, когда какие-то возбудители уже были обнаружены другими методами.

Как подготовиться к ПЦР-12?

Возможно, вы приняли решение сдать Пцр на 12 инфекций.

Вы уже нашли лабораторию или клинику в Москве, где делают этот анализ.

Но насколько правильные результаты покажут диагностические тесты, во многом зависит от качества вашей подготовки.

Вот несколько простых правил, которые помогут снизить риск ложноположительного или ложноотрицательного результата:

  • не вступайте в половые контакты за 2-3 суток до сдачи анализов
  • не принимайте антибиотиков 2 недели
  • не используйте местные препараты, не делайте спринцеваний или лечебных ванночек
  • утром в день исследования можно не мыться вообще, либо использовать только воду без моющих средств
  • за 3 часа до забора мазков нельзя мочиться

Это позволит с одной стороны не уничтожить бактерий, которые находятся в верхних отделах урогенитального тракта.

С другой – не занести контаминационную флору, которая на самом деле не ваша, но может дать положительные результаты ПЦР.

Дорого ли сдавать Пцр на 12 инфекций?

Сдавать этот анализ совершенно недорого.

В разных лабораториях предлагают разный набор исследований.

Дополнением к ПЦР может быть бактериоскопическое исследование урогенитального мазка.

Поэтому цена Пцр на 12 инфекций бывает разной.

Но в среднем это обходится в сумму от 50 до 100 долларов.

Причем, обычно это ближе к 50, чем к 100.

Даже для людей с небольшими доходами эта сумма совершенно не отягощает семейный бюджет.

Тем более что раз у вас возникла необходимость в сдаче подобных анализов, то вы явно сэкономили на презервативах.

В любом случае лечиться от запущенных хронических инфекций – гораздо дороже.

Не говоря уже о серьезных рисках для здоровья, которые несут некоторые возбудители ЗППП.

Пцр на 12 инфекций: куда обратиться?

Чтобы сдать Пцр на 12 инфекций, мы приглашаем вас в нашу клинику.

Наши преимущества:

  • Мы работаем с несколькими лабораториями, и всегда знаем, куда лучше отправить ваши анализы, чтобы получить максимально точные результаты.
  • Врач возьмет мазок совершенно безболезненно, по особой авторской методике.
  • Идеальные соблюдения правил асептики и антисептики, поэтому не развиваются осложнения после взятия мазков.
  • Возможность анонимного обследования.
  • По результатам анализов вы можете получить консультацию врача-венеролога.

Если какие-то инфекции будут обнаружены, вы сможете пройти курс терапии в нашей клинике.

Многие венерические болезни лечатся легко, буквально одной таблеткой или одним уколом.

Главное – вовремя обратиться за помощью и не ждать, пока свежая инфекция перейдет в хроническую форму.

Для того, чтобы быстро и безболезненно сдать анализ Пцр на 12 инфекций,обращайтесь к автору этой статьи – венерологу в Москве с многолетним опытом работы.

Анализы методом ПЦР

ПЦР 12

Полимеразную цепную реакцию (Polymerase chain reaction, ПЦР, PCR) изобрёл в 1983 году американский биохимик Кэри Б. Мюллис. В 1993 году за это открытие он был удостоен Нобелевской премии.

Сегодня области применения ПЦР как современного метода молекулярной биологии чрезвычайно широки. Особое место диагностика ПЦР занимает в медицинской практике. И причина этому достаточно проста: полимеразная цепная реакция делает невозможное возможным.

Часто диагностику ПЦР образно описывают как метод, с помощью которого можно находить иглу в стоге сена и затем строить стог из этих игл. “Иглой” является крошечный фрагмент генетического материала клеток (ДНК или РНК).

Таким образом, открытие этого метода – одно из наиболее выдающихся событий в области молекулярной биологии за последние десятилетия. Развитие метода ПЦР позволило медицинской диагностике в целом подняться на качественно новый уровень.

Основы ПЦР

Основа метода – многократное избирательное копирование (амплификация) определённого участка ДНК с целью получения такого количества генетического материала, которого будет достаточно для визуальной детекции. При этом многократно копируется (амплифицируется) только заданный участок ДНК при условии, что он присутствует в исследуемом биоматериале.

Кроме того, исследование помимо простого увеличения количества копий участков ДНК позволяет проводить другие манипуляции с генетическим материалом. Поэтому метод широко применяется в научных исследованиях, биологической и медицинской практике: в диагностике инфекционных и наследственных заболеваний, при выявлении мутаций, генотипировании, установлении отцовства, идентификация личности и др.

Пцр в диагностике инфекционных болезней

Сегодня ПЦР-диагностика инфекций – один из самых точных, чувствительных и эффективных клинических лабораторных методов. Причём спектр выявляемых возбудителей практически неограничен – была бы разработана тест-система для ПЦР-анализа искомого возбудителя.

Благодаря своей высокой чувствительности, ПЦР позволяет выявить возбудителя даже при его минимальном содержании (то есть в исследуемом биоматериале присутствуют всего несколько молекул его ДНК).

ПЦР выявляет возбудителей инфекционных заболеваний тогда, когда это невозможно сделать другими методами (иммунологическими, культуральными, микроскопическими).

Поэтому для целого ряда возбудителей инфекций метод полимеразной цепной реакции стал «золотым стандартом», он проверен временем и апробирован клинически. В современной лабораторной диагностике инфекционных болезней ПЦР – самый чувствительный и специфичный метод прямого обнаружения возбудителей.

Это позволяет не только установить этиологию заболевания, но и контролировать течение инфекционного процесса и оценивать эффективность проводимого лечения.

Анализ на ИППП методом ПЦР особенно актуальны при бессимптомном течении инфекционного процесса, вызванного безусловно-патогенными микроорганизмами (Хламидия , качественное определение ДНК; Микоплазма, качественное определение ДНК; Возбудитель гонореи, качественное определение ДНК;  Возбудитель трихомоноза, качественное определение ДНК). Например, при хронической гонорее у женщин даже с помощью бактериологического метода часто не удается выявить гонококк, несмотря на имеющиеся симптомы хронического воспалительного процесса в шейке матки или уретре.

Современная ПЦР-диагностика позволяет не только выявить генетический материал возбудителей инфекций, но и определить концентрации их ДНК/РНК (количественный формат исследования).

Определение количества возбудителей имеет важное значение в решении вопроса о назначении лечения, особенно если выявлены условно-патогенные микроорганизмы (Микоплазма, количественное определение ДНК; Типирование уреаплазмы, количественное определение ДНК) .

Одним из основных направлений развития метода ПЦР является разработанный в CMD формат «Мультипрайм», позволяющий выявить в одной пробирке (и одной реакции) нескольких патогенов.

ПЦР-диагностика гепатитов

В настоящее время известно как минимум 5 вирусов, способность которых вызывать поражение печени доказана. Это возбудители гепатита А, В, С, D, Е. В редких случаях гепатит может быть вызван вирусами Эпштейна-Барр и простого герпеса.

Способность поражать печень таких агентов как вирусы ТТ и гепатита G сегодня признается не всеми.

Все эти вирусы относятся к различным семействам, имеют разные биологические свойства и соответственно, тактика лечения будет тоже значительно отличаться в зависимости от этиологии гепатита.

Учитывая вышеизложенное, весьма актуальной проблемой является адекватная этиологическая диагностика вирусных гепатитов с выявлением конкретного возбудителя.

Без использования современных молекулярно-биологических методов это невозможно.

Поэтому диагностика гепатитов методом полимеразной цепной реакции – один из самых важнейших шагов в установлении причины заболевания и определения дальнейшей тактики лечения.

Пцр в диагностике вич-инфекции

В настоящее время для лабораторной диагностики ВИЧ-инфекции используется наиболее доступный и одновременно чувствительный подход – обнаружение в крови антител к ВИЧ с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) – с последующим подтверждением положительных результатов анализа методом иммуноблоттинга (ИБ). Эффективность выявления лиц, инфицированных ВИЧ, с помощью данного подхода может достигать 99% и более.

Но серологическая диагностика ВИЧ-инфекции имеет ряд ограничений:

  1. Неэффективность в период т.н. «серологического окна» (в первые недели после заражения антитела не выявляются по причине их отсутствия или низкой концентрации).
  2. Антитела к ВИЧ длительное время выявляются у всех детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей.
  3. Ложноположительные результаты ИФА из-за присутствия в крови антител к антигенам, сходным с антигенами ВИЧ.
  4. Ложноотрицательные и сомнительные результаты ИФА и иммуноблоттинга (особенно у пациентов в терминальной стадии заболевания).

Поэтому анализы ПЦР при обследовании на ВИЧ-инфекцию сегодня находят всё более широкое применение. Согласно «Методическим рекомендациям о проведении обследования на ВИЧ-инфекцию» (утв. Минздравсоцразвития РФ 06.08.

2007) «при наличии эпидемиологических критериев, свидетельствующих о недавнем риске заражения ВИЧ для пациентов и при этом предположительно ложноположительных или ложноотрицательных результатов в ИФА и ИБ, например, при обследовании детей, рожденных от ВИЧ-инфицированных матерей, или пациентов в периоде «серонегативного окна» используется метод ПЦР, при котором обнаруживается генный материал ВИЧ…..». А в случае уже установленного диагноза ВИЧ-инфекции анализ методом ПЦР используется для прогноза, динамического наблюдения и мониторинга проводимой терапии.

В Центре молекулярной диагностики (CMD) можно сдать ПЦР-анализ на ВИЧ анонимно.

Где сдать анализы ПЦР?

Для этого обращайтесь к разделу сайта «Где сдать анализы».

ПЦР-12: какие инфекции входят, как проводится сдача анализов, преимущества данного метода

ПЦР 12

  • 7 Октября, 2019
  • Инфекционные болезни
  • Вера Васильева

Один из самых современных методов молекулярной диагностики – полимеразная цепная реакция (ПЦР) – был открыт более тридцати лет назад и нашел широкое применение в медицине. Метод позволяет определить тип инфекции и дает количественную оценку того, сколько микробов присутствует в организме.

Общие сведения о ПЦР

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод молекулярной биологии для создания нескольких копий определенного сегмента ДНК.

Его используют в связи с тем, что ДНК зачастую бывает получена в концентрации, недостаточной для исследования, либо когда нужно выделить определенный фрагмент ДНК.

Многократное копирование нужного участка производится при помощи фермента под названием ДНК-полимераза, который удлиняет ДНК, достраивая комплементарную цепь.

Значение ПЦР в диагностической практике

На данный момент метод ПЦР имеет важное значение как в науке, так и в прикладных сферах. С помощью этого метода был совершен прорыв в выявлении большого количества заболеваний, что позволило значительно поднять уровень медицинской диагностики. Основные сферы применения ПЦР:

  • уточнение вида инфекционного агента;
  • выявление острых и хронических инфекционных заболеваний различной локализации;
  • контроль эффективности проведенной терапии.

ПЦР-диагностика позволяет обнаружить бактерии (среди которых инфекция хеликобактер пилори), вирусы (например, гепатит С), грибки и простейшие.

В настоящее время ПЦР является распространенным и часто незаменимым методом, используемым в медицинских и биологических исследовательских лабораториях.

Отличные результаты ПЦР на ИППП (инфекции, передаваемые половым путем) сделали его ведущим методом для постановки окончательного диагноза при данных заболеваниях. Популярными комплексными исследованиями на основе метода ПЦР являются анализы на 6, 12 и 15 инфекций.

Какие инфекции входят в ПЦР-12

ИППП развиваются в результате воздействия условно патогенной и патогенной микрофлоры на органы мочеполового тракта. При помощи метода ПЦР возможно обнаружить заболевания, протекающие как в острой, так и в хронической форме, а также задолго до того, как появятся первые симптомы болезни. Пациентов часто интересует вопрос о том, какие инфекции входят в ПЦР-12? Перечислим эти заболевания:

  1. Гарднереллез.
  2. Хламидиоз (вызванный видом хламидия трахоматис).
  3. Микоплазмоз (вызванный микоплазмами хоминис или гениталиум).
  4. Гонорея.
  5. Кандидоз (вызванный в первую очередь грибами кандида альбиканс).
  6. Уреаплазмоз.
  7. Герпес 1 и 2 типа.
  8. Трихомониаз.
  9. Вирус папилломы человека (в том числе анализ ВПЧ 16 типа и 18).
  10. Цитомегаловирус.
  11. Анализ на гепатиты разных групп.
  12. ВИЧ-инфекция.

Анализ на ВИЧ с помощью ПЦР позволяет обнаружить инфицирование на сроках 3-4 недель.

Показания для назначения ПЦР-12

ПЦР на двенадцать инфекций проводится при наличии симптомов воспалительного заболевания в органах репродуктивной системы либо с профилактической целью. Учитывая то, какие инфекции входят в ПЦР-12, проведение анализа может назначить уролог, гинеколог, венеролог. Распространенные причины для сдачи анализа:

  • Подозрительные или неприятные симптомы. К таким симптомам относятся болезненное мочеиспускание, зуд, появление сыпи, язвочек или нетипичные выделения из половых органов. Ошибочно полагать, что ИППП нельзя заразиться другими способами. Это заблуждение — партнеры могут быть здоровы и верны друг другу, а заражение произошло половым путем. Вероятность этого невелика и не превышает 5 %, но и это немало. К примеру, заразиться гонореей можно, использовав чужое полотенце. Риск возрастает при совместном проживании с носителем инфекции. Следовательно, бытовой способ заражения патогенными микроорганизмами также не стоит исключать. Важно вовремя обращаться к специалисту при любых тревожных симптомах. Период от момента заражения до возникновения первых симптомов может длиться от нескольких дней до пары неделей или даже месяцев. Но также важно помнить, что возможно и бессимптомное протекание заболевания.
  • Большое количество половых партнеров и пренебрежение средствами барьерной контрацепции. В таком случае рекомендуется проведение ежегодной диагностики с целью выяснения, присутствуют ли в организме опасные инфекции.
  • Проведение обследования при планировании беременности. Каждой паре перед зачатием рекомендуется сдать анализ ПЦР. Этот метод позволит выявить скрытые заболевания, которые могут быть переданы от матери ребенку при беременности и родах и предотвратить инфицирование.
  • Бесплодие. Половые инфекции могут приводить к нарушениям фертильности. При неспособности зачатия в течение года при условиях активной сексуальной жизни без контрацепции рекомендуется сделать ПЦР на двенадцать инфекций.
  • Операции на мочевом пузыре, простате, матке, яичниках и других органах малого таза. При хирургическом вмешательстве наличие инфекций может быть очень опасным, поскольку они могут привести к появлению осложнений после операции.

При наличии хотя бы одного из представленных выше признаков рекомендуется воспользоваться диагностикой методом ПЦР. Вовремя не обнаруженные и не пролеченные инфекционные заболевания могут приводить к появлению серьезных осложнений, таких как простатит, эпидидимит у мужчин и вагинит, аднексит у женщин. Причинами бесплодия у мужчин и женщин больше чем в половине случаев являются ИППП.

Особенности сдачи анализа

Биоматериалом для проведения ПЦР-12 зачастую является соскоб из уретры, соскоб из цервикального канала, соскоб из влагалища либо смешанный соскоб.

Проведенная в современных диагностических центрах процедура анализа не должна причинять пациенту значительных болезненных ощущений. При проведении забора биологического материала используется анестезирующий крем, который снижает чувствительность и позволяет провести анализ без причинения дискомфорта.

Врачу необходимо тщательно соблюдать методику забора. Для избежания ложноотрицательных результатов важна стерильность пробы, отсутствие крови и исключение попадания возбудителей с других участков тела.

Рекомендации по подготовке к анализу

Для получения достоверных результатов пациентам, проходящим обследование методом ПЦР, необходимо придерживаться следующих рекомендаций:

  • перед сдачей анализа в течение 2-3 часов рекомендуется не мочиться;
  • анализ не проводится во время менструаций;
  • за день до обследования нельзя выполнять спринцевание влагалища;
  • за 3-5 дней до анализа рекомендуется исключить применение вагинальных таблеток, свечей и кремов;
  • не рекомендуется проводить анализ при приеме антибиотиков и в течение двух суток после интравагинального УЗИ и кольпоскопии;
  • следует исключить половую активность за 2-3 суток до сдачи анализа.

Расшифровка результатов анализа

При соблюдении рекомендаций ошибки в результатах анализа методом ПЦР практически исключены. Подготовка результатов может занимать до 2 суток, однако в некоторых современных лабораториях анализы готовы уже в течение одного рабочего дня.

Результаты анализа ПЦР-12 могут быть положительными и отрицательными. Отрицательный результат свидетельствует о том, что инфекции не обнаружены. Положительный результат значит то, что в исследуемом материале присутствуют инфекционные элементы, и пациенту требуется качественное лечение.

Также результат может быть положительным при носительстве инфекции, при этом проводить лечебные мероприятия нет необходимости. Какие инфекции входят в ПЦР-12 и могут быть примерами таких заболеваний? К ним относятся папилломавирусная инфекция, герпес и другие заболевания.

Тем не менее важно знать, что человек, который является носителем, может заразить здоровых людей, даже если его самого данная болезнь не беспокоит.

Если в результате анализа присутствуют показатели с положительными значениями, необходимо обратиться к врачу для назначения эффективной терапии. Бывают ситуации, когда ПЦР показывает сомнительный результат, в таком случае следует сделать повторный анализ через 12-14 дней.

Кроме качественной характеристики, анализ ПЦР может иметь и количественную. С помощью количественной характеристики специалист может определить активность, стадию развития заболевания и выбирать наиболее подходящий для лечения препарат.

Преимущества метода ПЦР

К преимуществам метода относятся:

  • высокая чувствительность — возможность выявления возбудителя заболевания на ранних стадиях и при латентном протекании болезни;
  • широкий охват — исследование одного образца может обнаружить нескольких инфекционных агентов;
  • оперативность — время проведения ПЦР занимает, как правило, не более 5-7 часов, то есть получить результаты анализа возможно уже на следующий день;
  • точность — если была соблюдена технология проведения анализа, ложноположительные или ложноотрицательные результаты встречаются крайне редко;
  • невысокая стоимость – по цене анализ сравним с другими лабораторными анализами крови.

Недостатки метода

Однако следует понимать, что методов анализа без недостатков не бывает. Минус ПЦР — высокие требования к следованию методики исследования и к профессионализму медицинских работников. При загрязнении образца результат может быть ошибочным. Поэтому проводить ПЦР следует в профессиональных лабораториях, где применяются системы контроля качества работы.

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.